Real-time Quantitative PCR

即時定量PCR

即時定量PCR（Real-time Quantitative PCR，簡稱qPCR）是一種利用螢光訊號即時監測PCR擴增過程的分子生物學技術。與傳統 endpoint PCR 不同，qPCR 在每一個循環結束後偵測螢光強度，根據螢光曲線的Ct值（cycle threshold）可推算目標基因的初始拷貝數，實現高靈敏度的定量分析。

此技術廣泛應用於基因表達分析，可比較不同組織或處理條件下的mRNA水準；在臨床診斷中，用於病原體檢測、病毒載量監測及癌症標記的定量；此外，亦可結合逆轉錄PCR進行DNA複製行為的即時監控。

qPCR 的核心組分包括特異性熒光探針（如 TaqMan）或 DNA 結合染料（如 SYBR Green），以及精確的溫控模組。實驗設計需考慮引子設計、效率和特異性，以確保結果的可重複性。隨著儀器靈敏度的提升，qPCR 已成為分子實驗室不可或缺的工具。